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C、电泳过程中保持恒定的电压(90~110V)可使蛋白质组分有效分离
D、点样量太多时,蛋白质组分相互粘联,指印谱带会严重拖尾,结果不易分析
三、是非判断(用“对”、“错”表示,并填入括号中)
1.胰岛素分子中含有两条多肽链,所以每个胰岛素分子是由两个亚基构成( )
2.蛋白质多肽链中氨基酸的种类数目、排列次序决定它的二级、三级结构,即一级结构含有高级结构的结构信息。( )
3.肽键中相关的六个原子无论在二级或三级结构中,一般都处在一个刚性平面内。( )
4.构成天然蛋白质的氨基酸,其D-构型和L-型普遍存在。( ) 5.变构效应是蛋白质及生物大分子普遍的性质,它有利于这些生物大分子功能的调节。( )
6.功能蛋白质分子中,只要个别氨基酸残基发生改变都会引起生物功能的丧失。( )
7.具有四级结构的蛋白质,当它的每个亚基单独存在时仍能保持蛋白质有的生物活性。( )
8.胰岛素分子中含有A7-S-S-B7,A20-S-S-B19和A6-S-S-A11三个二硫键,这些属于二级结构的内容。( )
9.?-折叠是主肽链相当伸展的结构,因此它仅存在于某些纤维状蛋白质中。( )
10.在RNase(核糖核酸酶)分子中存在His12、His119侧链的咪唑基及
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Lys41-NH3由于多肽链是按特定方式折叠成一定空间结构,这三个在一级结构上相距甚远的氨基酸残基才彼此靠近构成RNase的催化中心。( )
11.变性后的蛋白质电泳行为不会改变( )
12.沉降系数S是蛋白质以及核酸分子量大小常用的表示单位。( ) 13.调节溶液的pH值对盐析分离蛋白质影响不大。( ) 14.Folin-酚试剂法测定蛋白质的灵敏度较高,但由于不同蛋白质含有酪氨酸的量不尽相同,会使测定结果往往带来较大偏差。( ) 15.重金属盐对人畜的毒性,主要是重金属离子会在人体内与功能蛋白质结合引起蛋白质变性所致。( )
16.利用蛋白质系数计算粗蛋白含量时对不同的生物样品都一样(即为6.25)。( )
17.胰蛋白酶作用时对肽键N-端氨基酸残基的要求是赖氨酸或精氨酸,这种专一性可称为基团专一性。( )
18.同源蛋白质中,保守性较强的氨基酸残基在决定蛋白质三维结构与功能方面起重要作用,因此致死性突变常常与它们的密码子突变有关。( )
O 19.肽平面或酰胺平面是因为-C-NH-结构中 C=0的?电子离域或说是sp杂化N的孤对电子与 C=0 P-?共轭后引起的。( ) 20.有两种蛋白质A和B的等电点分别是6.5和7.2,在pH为8.5的条件下同一静电场中A一定比B向异极泳动速度快。( ) 21.多肽链出现180°回折的地方会形成转角,其中甘氨酸和脯氨酸
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常出现在?-转角处,因为其侧链较短,对4→1氢键形成空间位阻小。( )
22.苯丙氨酸疏水性比缬氨酸强( )
23.由于静电作用,在等电点时氨基酸的溶解度最小( ) 24.渗透压法、超离心法、凝胶过滤法及PAGE(聚丙稀酰胺凝胶电泳)法都是利用蛋白质的物理化学性质来测定蛋白质的分子量的( ) 25.当某种蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于碱性氨基酸残基数目时,此蛋白质的等电点为7.0( )
26.蛋白质的亚基(或称为亚单位)和肽是同义词( ) 四、解释下列名词
1.二面角 2.蛋白质一级结构 3.蛋白质二级结构
4.蛋白质三级结构 5.蛋白质四级结构 6.超二级结构 7.别构效应 8.同源蛋白质 9.简单蛋白质 10.结合蛋白质 11.蛋白质变性作用 12.蛋白质盐析作用
13.蛋白质分段盐析 14.结构域 15.寡聚蛋白 16.构象 17.构型 18.肽单位 19.肽平面 20.?—螺旋 21.?—折叠或?—折叠片
22.超二级结构 23.?—转角 24.蛋白质的变性作用
25.蛋白质的复性作用 26.亚基
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五、问答题
1.组成蛋白质的20种氨基酸依据什么分类?各类氨基酸的共同特性是什么?这种分类在生物学上有何重要意义?
2.蛋白质的基本结构与高级结构之间存在的关系如何? 3.Edman反应所有的试剂和反应的特点如何?
4.何谓蛋白质等电点?等电点时蛋白质的存在特点是什么? 5.何谓盐析?分段盐析粗分蛋白质的原理是什么?
6.哪些因素可引起蛋白质变性?变性后蛋白质的性质有哪些改变? 7.蛋白质分离分析技术常用的有哪几种,简述凝胶过滤、电泳基本原理。
8.有哪些沉淀蛋白质的方法?其中盐析和有机溶剂沉淀法有何区别或特点?
9.溴化氰在多肽裂解中的作用部位,和裂解产物的末端氨酸残基为何物?
10.举例说明蛋白质一级结构与功能关系。 11.举例说明蛋白质变构效应与意义。
12.一样品液中蛋白质组分为A(30KD)、B(20KD)、C(60KD),分析说明用SephadexG100凝胶过滤分离此样品时,各组分被洗脱出来的先后次序。
13.多聚赖氨酸(poly-Lys)在pH7时呈无规线团,在pH10时则呈?-螺旋;而多聚的谷氨酸酸(poly-Glu)在pH7时也呈无规线团,而在pH4时则呈?-螺旋,为什么?
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14.简述胰蛋白酶原激活过程。
15.?-螺旋的特征是什么?如何以通式表示?
16.高浓度的硫酸铵(pH5时)可使麦清蛋白沉淀析出,并用于初步分离该种蛋白的早期步,简要说明其原理。
17.用阳离子交换柱层析一氨基酸混合液(洗脱剂:pH3.25,0.2N柠檬酸钠),其结果如下:①各洗脱峰的面积大小或高度有何含义?②Asp比Glu先洗脱出来的原因?
吸 光 度
洗脱剂流出体积
18.为什么鸡蛋清可用作铅中毒或汞中毒的解毒剂?
六、计算题