四.有毒有菌污物处理要求
微生物实验所用实验器材、培养物等未经消毒处理,一律不得带出实验室。
1. 经培养的污染材料及废弃物应放在严密的容器或铁丝筐内,并集中存放在指定地点,待统一进行高压
灭菌。
2. 经微生物污染的培养物,必须经121℃,30min高压灭菌。
3. 染菌后的吸管,使用后放入5%煤酚皂溶液或石炭酸液中,最少浸泡24h(消毒液体不得低于浸泡的高
度)再经121℃,30min高压灭菌。
4. 涂片染色冲洗片的液体,一般可直接冲入下水道,烈性菌的冲洗液必须冲在烧杯中,经高压灭菌后方
可倒入下水道,染色的玻片放入5%煤酚皂溶液中浸泡24h后,煮沸洗涤。做凝集试验用的玻片或平皿, 必须高压灭菌后洗涤。
5. 打碎的培养物,立即用5%煤酚皂溶液或石炭酸液喷洒和浸泡被污染部位,浸泡半小时后再擦拭干净。
污染的工作服或进行烈性试验所穿的工作服、帽、口罩等,应放入专用消毒袋内,经高压灭菌后方能洗 涤。
五.培养基制备要求
培养基制备的质量将直接影响微生物生长。因为各种微生物对其营养要求不完全相同,培养目的的不 同,各种培养基制备要求如下:
1. 根据培养基配方的成分按量称取,然后溶于蒸馏水中,在使用前对应用的试剂药品应进行质量检验。
2. pH测定及调节:pH测定要在培养基冷至室温时进行,因在热或冷的情况下,其pH有一定差异,当测
定好时,按计算量加入碱或酸混匀后,应再测试一次。培养基pH值一定要准确,否则会影响微生物的生 长或影响结果的观察。但需注意因高压灭菌可影响一些培养基的PH降低或升高,故不宜灭菌压力过高或 次数太多,以免影响培养基的质量,指示剂、去氧胆酸钠、琼脂等一般在调完pH后再加入。
3. 培养基需保持澄清,便于观察细菌的生长情况,培养基加热煮沸后,可用脱脂棉花或绒布过滤,以除
去沉淀物,必要时可用鸡蛋白澄清处理,所用琼脂条要预先洗净晾干后使用,避免因琼脂含杂质而影响 透明度。
4. 盛装培养基不宜用铁、铜等容器,使用洗净的中性硬质玻璃容器为好。
5. 培养基的灭菌既要达到完全灭菌目的,又要注意不因加热而降低其营养价值,一般121℃,15min即
可,如为含有不耐高热物质的培养基如糖类、血清、明胶等,则应采用低温灭菌或间歇法灭菌,一些不 能加热的试剂如亚碲酸钾、卵黄、TTC、抗菌素等,待基础琼脂高压灭菌后凉至50℃左右再加入;
6. 每批培养基制备好后,应做无菌生长试验及所检菌株生长试验。如果是生化培养基,使用标准菌株接
种培养,观察生化反应结果,应呈正常反应,培养基不应贮存过久,必要时可置4℃冰箱存放。
7. 目前,各种干燥培养基较多,每批需用标准菌株进行生长试验或生化反应观察,各种培养基用相应菌
株生长试验良好后方可应用,新购进的或存放过久的干燥培养基,在配制时也应测PH,使用时需根据产 品说明书用量和方法进行。
8. 每批制备的培养基所用化学试剂、灭菌情况及菌株生长试验结果、制作人员等应做好记录,以备查
询。
六.样品采集及处理要求
1. 所采集的检验样品一定要具有代表性,采样时应首先对该批食品原料、加工、运输、贮藏方法条件、
周围环境卫生状况等进行详细调查,检查是否有污染源存在。
2. 根据食品的种类及数量,采样数量及方法应按标准检验方法的要求进行。
3. 采样应注意无菌操作,容器必须灭菌,避免环境中微生物污染,容器不得使用煤酚皂溶液,用新洁尔
灭、酒精等消毒药物灭菌,更不能含有此类消毒药物或抗生素类药物,以避免杀死样品中的微