四.有毒有菌污物处理要求
微生物实验所用实验器材、培养物等未经消毒处理，一律不得带出实验室。
1. 经培养的污染材料及废弃物应放在严密的容器或铁丝筐内，并集中存放在指定地点，待统一进行高压
灭菌。
2. 经微生物污染的培养物，必须经121℃，30min高压灭菌。
3. 染菌后的吸管，使用后放入5%煤酚皂溶液或石炭酸液中，最少浸泡24h（消毒液体不得低于浸泡的高
度）再经121℃，30min高压灭菌。
4. 涂片染色冲洗片的液体，一般可直接冲入下水道，烈性菌的冲洗液必须冲在烧杯中，经高压灭菌后方
可倒入下水道，染色的玻片放入5%煤酚皂溶液中浸泡24h后，煮沸洗涤。做凝集试验用的玻片或平皿， 必须高压灭菌后洗涤。
5. 打碎的培养物，立即用5%煤酚皂溶液或石炭酸液喷洒和浸泡被污染部位，浸泡半小时后再擦拭干净。
污染的工作服或进行烈性试验所穿的工作服、帽、口罩等，应放入专用消毒袋内，经高压灭菌后方能洗 涤。
五.培养基制备要求
培养基制备的质量将直接影响微生物生长。因为各种微生物对其营养要求不完全相同，培养目的的不 同，各种培养基制备要求如下：
1. 根据培养基配方的成分按量称取，然后溶于蒸馏水中，在使用前对应用的试剂药品应进行质量检验。
2. pH测定及调节：pH测定要在培养基冷至室温时进行，因在热或冷的情况下，其pH有一定差异，当测
定好时，按计算量加入碱或酸混匀后，应再测试一次。培养基pH值一定要准确，否则会影响微生物的生 长或影响结果的观察。但需注意因高压灭菌可影响一些培养基的PH降低或升高，故不宜灭菌压力过高或 次数太多，以免影响培养基的质量，指示剂、去氧胆酸钠、琼脂等一般在调完pH后再加入。
3. 培养基需保持澄清，便于观察细菌的生长情况，培养基加热煮沸后，可用脱脂棉花或绒布过滤，以除
去沉淀物，必要时可用鸡蛋白澄清处理，所用琼脂条要预先洗净晾干后使用，避免因琼脂含杂质而影响 透明度。
4. 盛装培养基不宜用铁、铜等容器，使用洗净的中性硬质玻璃容器为好。
5. 培养基的灭菌既要达到完全灭菌目的，又要注意不因加热而降低其营养价值，一般121℃，15min即
可，如为含有不耐高热物质的培养基如糖类、血清、明胶等，则应采用低温灭菌或间歇法灭菌，一些不 能加热的试剂如亚碲酸钾、卵黄、TTC、抗菌素等，待基础琼脂高压灭菌后凉至50℃左右再加入；
6. 每批培养基制备好后，应做无菌生长试验及所检菌株生长试验。如果是生化培养基，使用标准菌株接
种培养，观察生化反应结果，应呈正常反应，培养基不应贮存过久，必要时可置4℃冰箱存放。
7. 目前，各种干燥培养基较多，每批需用标准菌株进行生长试验或生化反应观察，各种培养基用相应菌
株生长试验良好后方可应用，新购进的或存放过久的干燥培养基，在配制时也应测PH，使用时需根据产 品说明书用量和方法进行。
8. 每批制备的培养基所用化学试剂、灭菌情况及菌株生长试验结果、制作人员等应做好记录，以备查
询。
六.样品采集及处理要求
1. 所采集的检验样品一定要具有代表性，采样时应首先对该批食品原料、加工、运输、贮藏方法条件、
周围环境卫生状况等进行详细调查，检查是否有污染源存在。
2. 根据食品的种类及数量，采样数量及方法应按标准检验方法的要求进行。
3. 采样应注意无菌操作，容器必须灭菌，避免环境中微生物污染，容器不得使用煤酚皂溶液，用新洁尔
灭、酒精等消毒药物灭菌，更不能含有此类消毒药物或抗生素类药物，以避免杀死样品中的微生物，所 用剪、刀、匙用具也需灭菌方可应用。
4. 样品采集后应立即送往检验室进行检验，送检过程中一般不超过3h，如，路程较远，可保存在1～5℃
环境中，如需冷冻者，则在冻存状态下送检。
5. 检验室收到样品后，进行登记（样品名称、送检单位、数量、日期、编号等），观察样品的
外观，如果发现有下列情况之一者，可拒绝检验：
(1) 样品经过特殊高压、煮沸或其他方法杀菌者，失去代表原食品检验意义者；
(2) 瓶、袋装食品已启开者，熟肉及其制品、熟禽等食品已折碎不完整者，即失去原食品形状者（食物中
毒样品除外）；
(3) 按规定采样数量不足者；
对送检符合要求的样品，检验室收到后，应立即进行检验，如果条件不具备，应置4℃冰箱存放，及时准 备创造条件，然后进行检验。
6. 样品检验时，根据其不同性状，进行适当处理。
(1) 液体样品接种时，应充分混合均匀，按量吸取进行接种。
(2) 固体样品，用灭菌刀、剪取其不同部位共25g，置于225mL灭菌生理盐水或其他溶液中，用均质器搅
碎混匀后，按量吸取接种。
(3) 瓶、袋装食品应用灭菌操作启开，根据性状选择上述方法处理后接种。
七.样品检验、记录和报告的要求
1. 检验室收到样品后，首先进行外观检验，及时按照国家标准检验方法进行检验，检验过程中要认真、
负责、严格进行无菌操作，避免环境中微生物污染。
2，样品检验过程中所用方法、出现的现象和结果等均要用文字写出试验纪录，以作为对结果分析、判定 的依据，记录要求详细、清楚、真实、客观、不得涂改和伪造。